上世纪50年代,科研人员已经把血清添加到培养基中,并且取得了良好的培养效果,但是由于血清成分十分复杂,直至今天,血清中的所有成分仍未完全分析出来,并且血清成分及含量会随动物性别、年龄、生理条件的不同而发生改变。现阶段血清中已明确检测出含有各种蛋白质、多肽、生长因子、氨基酸、脂类、碳水化合物、无机物、维生素等,这些成分为细胞的正常生长提供了基本的营养物质。
一、血清的分类
血清有多种类型,以牛血清为例,可以划分为:胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清。
胎牛血清取自剖腹产的健康胎牛;
新生牛血清取自出生14h内未进食的新生牛;
小牛血清取自出生6月龄以内的健康小牛(企业内控标准);
成牛血清取自健康的成牛(企业内控标准)。
因胎牛未接触外界,血清中抗体、补体等对细胞有害成分最少,故胎牛血清品质最高。
二、血清的保存
长期保存建议存放于-15~-20℃环境中,若无法一次性将1瓶中的血清全部使用完毕,建议将血清分装到一次性能够用完的小瓶中,再进行冷冻保存,避免出现反复冻融现象。
血清在放入冷冻环境前,建议瓶中预留一定的体积空间,避免血清冻结后体积增大,撑破包装瓶,形成污染。
三、血清的解冻
血清解冻时,先将血清放在2~8℃的冰箱过夜,使之部分融解,然后置于室温条件下使之完全融解,在融解过程中需要规则地摇晃均匀,使血清全部融解。
在做细胞实验前,建议将完全融解的血清放置在37℃水浴锅内预热,再进行细胞实验。切勿直接将血清从-15℃放入37℃进行解冻,温度变化太大,会导致血清中蛋白质凝集析出,出现大量沉淀。
四、沉淀处理
血清正常解冻情况下,可能会出现一些沉淀物,造成这种情况的原因有许多种,但最普遍的是由于蛋白质变性造成的。通常这些沉淀物质不会影响血清的品质,如果希望去除这些沉淀物,可以将血清分装进无菌离心管中,以400g进行离心,离心后将上清液加入培养基内一起过滤即可,不建议以过滤的方式除去这些沉淀物,因为它们可能会堵塞过滤膜。
五
为保证牛血清原料的可追溯性,奥普赛与多家大型牛源基地合作,建立公司的血清原料采集站以实现对牛血清采集的过程控制。同时采取母体筛选、全封闭无菌采血等措施,使所有牛血清产品均可追溯其来源及母体健康状况,通过控制原料质量来保障牛血清产品的品质。
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