人T淋巴细胞白血病细胞HuT78/Hut-78智立细胞购买

 
 
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发货 湖北武汉市预售,付款后15天内
品牌 智立中特生物
产品型号 zl-077198
产品规格 1×10⁶cells/T25培养瓶
过期 长期有效
更新 2024-01-01 10:40
 






详细说明

  HuT78/Hut-78人T淋巴细胞白血病细胞是HuT78衍生出来的克隆。


  细胞特性


  1)来源:男疾病:皮肤白血病(塞扎里综合症)细胞类型:皮肤T淋巴细胞


  2)形态:淋巴母细胞,悬浮生长


  3)含量:>1x106细胞数


  4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装


  5)用途:仅供科研使用。


  运输和保存


  干冰运输及复苏好存活细胞


  (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。


  (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。


  细胞接收后的处理


  1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。


  2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。


  3)悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。


  4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代。


  一.培养基及培养冻存条件准备


  1)准备IMDM;优质胎牛血清,20%;P/S1%。


  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。


  3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。


  二.细胞处理:


  1)冻存细胞的复苏:


  将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。


  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


  对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:


  悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。


  3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。


  下面T25瓶为例;


  1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.


  2.1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。


  3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

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